斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别

斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别

首页维修大全综合更新时间:2023-09-21 22:15:07

斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别

1、作用不同:斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应。

2、配置方法不同:

斐林试剂配制方法:0.1 g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配制方法是将50 g氢氧化钠和137 g酒石酸钾钠溶于500 mI蒸馏水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。乙液配制方法是将34.5 g结晶硫酸铜溶于500 ml水中,加0.5 mI硫酸。混合均匀。

双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液;双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液.先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL,振荡均匀(营造碱性环境),再加入1~2滴双缩脲试剂B,振荡均匀。

3、使用方法不同:

斐林试剂使用时,先反溶液和溶液混合(将滴溶液滴入溶液中),而后立即使用。

双缩脲试剂使用时,先加入溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴溶液,振荡摇匀后观察现象。

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