
不同的DNA分子的基本组成单位都是脱氧核苷酸。脱氧核苷酸之间都是通过磷酸二酯键相连。所以不同DNA分子能拼接的基础是通过磷酸二酯键相拼接。再就是不同DNA分子的长链之间的碱基通能通过碱基互补配对原则形成碱基对。使不同DNA分子拼接后在结构上具有一定的稳定性。
因为我们有工具酶,就是DNA连接酶、限制性核酸内切酶。基因是由四种碱基排列组合形成的,必然会在一些位置存在适合某种限制性核酸内切酶的识别和作用的碱基排列。
尤其是Type II 限制性核酸内切酶识别和作用的位置多为短的回文序列,所剪切的碱基序列通常即为所认知的序列,更好用。
当两个不同来源的DNA被同一种限制性核酸内切酶切割后,产生的粘性末端是相同的,所以是可以以一方的3’端和另一方的5’端互补到一块的,通过DNA连接酶的作用,在互补的末端形成3′,5′-磷酸二酯键,从而形成非断裂的新的完整DNA。