如何分析高效液相色谱图(高效液相色谱法基本操作方法)

如何分析高效液相色谱图(高效液相色谱法基本操作方法)

首页维修大全综合更新时间:2025-02-07 14:38:41

如何分析高效液相色谱图

高效液相色谱图分析要参考多方面因素。现在以液相色谱反相谱图C18,VWD检测器进行分析。
1,出峰越靠前,说明物质极性越大,同时说明结构中含杂原子,极性键,比如羧基,氨基,等。
2,峰响应值越高,说明有机物中共轭越多,有时物质已经带了颜色,进入可见区。
3,峰型不好时,多是含双(多)基团,尤其是氨基酸类。
4,根据PH调整看峰型,能基本判断PKA,有利于判断物质结构。
5,多种条件分离都很困难时,并且峰型相似,一般多是两种或多种异构。
6,通过出峰顺序可判断物质处理(如重结晶)所使用溶剂。
7,波长与响应值对应,来判断可能结构。(相当于四大谱之一的紫外)

拓展资料

相关术语

⊕色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。

⊕基线(base line)--流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。

⊕噪音(noise)――基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

⊕漂移(drift)基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。

⊕色谱峰(peak)--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和脱尾峰(tailing peak ).前者少见。

⊕拖尾因子(tailing factor,T)--T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T<0.95为前延峰,T>1.05为拖尾峰。

⊕峰底――基线上峰的起点至终点的距离。

⊕峰高(Peak height,h)――峰的最高点至峰底的距离。

⊕峰宽(peak width,W)--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。

⊕半峰宽(peak width at half-height,Wh/2)--峰高一半处的峰宽。W h/2=2.355σ。

⊕标准偏差(standard deviation, σ)--正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小,分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。

⊕峰面积(peak area,A)――峰与峰底所包围的面积。A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h

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