液体培养法是在培养基中不加凝胶剂,原生质体悬浮在液体培养基中,先将原生质体用培养液调整到一定细胞密度,取出34mL置于培养皿中浅层静止培养的方法。一般在原生质体培养的早期优先使用这种方法,因为:
①稀释和转移操作比较容易;
②一些品种的原生质体在琼脂化培养基中不能分裂;
③培养基的渗透压能被有效地降低;
④培养几天后,所培养细胞的密度能降低。这种方法缺点是不能从一个母细胞中分离出单个克隆。常用的是液体浅层培养法,即将原生质体培养在底部铺一薄层液体培养基的培养皿中。这种方法操作简便,对原生质体伤害较小,且便于添加培养基和转移培养物,是目前原生质体培养工作中广泛应用的方法之一。其缺点是原生质体在培养基中分布不均匀,容易造成局部密度过高或原生质互相粘连而影响进一步的生长发育,并且难以定点观察,很难监视单个原生质体的发育过程。