琼剧的角色行当分为五大行。即生、旦、净、末、丑。
生行包括正生、贴生、武生、小孩生。正生：文戏佬倌，又名文雅小生。以唱、做功为重，扮相英俊．喜手持白纸小扇，举止动作温文文雅、潇洒大方。主要步法为方步，多扮演贫苦士子或富户之子。表演要求儒雅秀逸、舒展斯文、风流倜傥。如《琵琶记》中的蔡伯喈，《彩娄记》中的吕蒙正，《张文秀》中的张文秀，《秦香莲》中的陈世美等。
20世纪初起，正生也扮演有武打的文戏，称“文武小生”，如《王注断臂》中的王位，《苦风莺怜》中的马元卿。《游龟山》中的田玉川等。小生历代出过不少名家，如清代的金公仔、汪桂生、黄银彩、陈俊彩、郭庆生。民国时期的田巨昌、雪梨生、郑长和、李积锦等。
贴生：文戏佬倌。可分为二贴、三贴。为正生因故不能演出之替代角色，唱做功与正生同，常有由贴生晋升正生之的。
戏中有较年少的书生、公子、官宦等重要副角，多由贴生扮演，如《十八台大轿》中的刘进士，《苦凤莺怜》中的知县李世勋，《孟丽君》中的皇甫少华等。
武生：武生演员多跟武科师傅习练武术，武功宗“少林”功夫。身手敏捷，拳角功夫、棍棒功夫须过硬．舞台表演使用兵器均为真具。武生分正小武、贴小武、大武。
小孩生：也叫娃娃生。一般由年轻的学徒担任。表演上要求活泼好动，天真顽皮，并可随意发挥，如《秦香莲》中的春哥，《乞丐捐道》中的梅奴和《乾隆皇游江南》中的绪儿等角色，均为小孩生应工。
旦行有正旦、贴旦、花旦、老旦、彩旦、梅香旦、武旦。
正旦：多扮演贤淑含蓄，仪表庄端的女性角色，不论男旦、女旦，均用假嗓唱戏。20世纪20年代始，有些伶工改用真假嗓的“子母喉”，个别艺人则用“真嗓”。
正旦重于唱、做功，讲求唱腔亮丽、清脆、娇嫩，身段优美，步法轻盈。步行时，多用后角尖顶前角跟，且有碎步、蝶步等多种步法。剧中的已婚年轻妇女，大户闺门，小家碧玉等角色，多由正旦扮演。
表演时，常手执小扇或手帕。动作灵巧而不失持重，娇健而不失娟秀，神态温柔而略含羞涩。如《游春》中的杨贵妃，《浣纱记》中的西施，《铡美案》中的秦香莲，《西厢记》中的崔莺莺等。
正旦也可细分为闺门旦和苦旦。如《红叶题诗》中的姜玉蕊、《张文秀》中的王三姐为闺门旦，《孟姜女》中的孟姜女，《秦香莲》中的秦香莲，《苦风莺怜》中的冯彩凤等为苦旦。
20世纪初的男旦张禄金、姚赛蛟、陈成桂，女旦龙波、陈安香、琼丽卿等，均为著名正旦。
净行有大花脸、二花脸、三花脸。未行有黑须未，白须未。丑行有杂角、花生。
另外，琼剧角色行当中尚有已消失的杂经头和四大金刚。旦净唱假嗓，其余行当唱真嗓。文戏重唱不重做，许多艺人都以唱闻名。
