克隆载体质粒必须带的是质粒载体↑的抗性基因,用于基因工程的筛选。同时含有复制原点,可带目的基因一起复制。同时要有启动子和终止子,可以通过转录和翻译表达目的基因,
(1)克隆载体和表达载体的功能不同:
①克隆载体是在克隆过程中用到的各种质粒,比如为了扩增目的基因的高拷贝质粒、为了方便测序的测序质粒、为了连接PCR产物的TA质粒、为了重组的穿梭质粒等等。克隆载体一般有较强的复制能力,利于基因的保存和扩增,而且提供丰富的酶切位点等等。它不必有强启动子,因为不重于表达。
②表达载体是基因克隆结束后,为了在特定细胞内表达而构建的。它重点在于表达,有各种各样的启动子适应于不同种类的细胞,并且有各种各样,如诱导等可控的表达调控方式。
(2)克隆载体和表达载体必需元件的原件如下:
①克隆载体所具备的元件:目的基因、复制子、多克隆位点、标记基因。
②表达载体所具备的元件:目的基因、启动子、终止子、标记基因。