一、DNA提取的完整步骤 :
1. 取新鲜或冷冻样品的肌肉组织100ul-200ul或95%ALC保存的样品组织0.05g。 2. 将组织尽量剪碎,分别装入1.5ml 的离心管中。
3. 每管中加入450ul的裂解缓冲液(10mM Tris-HCl pH8.0; 100mM EDTA, pH8.0)
4. 每管加入10% SDS 50-100ul(70-80不定) (1-2%),再加入2.5-5ul(3ul)蛋白酶K (20mg/ml),使其终浓度达100ug/ml. 混匀,55℃ 3h至过夜(期间将管子颠倒几次)。
5. 样品中加入150ul NaCl(盐析作用),室温8000rpm离心20min,去沉淀,然后在上清液