基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤,而基因表达载体的本质是DNA,组成元素有碳氢氧氮磷,其中氮在含氮碱基中,磷在磷酸基团中完整的表达载体必须包括:
1、复制子,在细菌中扩增时所必须.
2、启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”.
3、原核筛选标记,细菌增菌所必须.
4、真核筛选标记,如果是真核表达,就是必须的.
5、多克隆位点,即酶切位点,插入目的片段的区域.
6、其他所需构件,可视实验设计情况而选用现成载体或在载体上自行添加.另:表达的起始和终止,在目的基因上附带起始密码子和终止密码子.
启动子:RNA酶的结合部位 终止子:一段有特殊结构的DNA短片段,转录结束的标志 目的基因:这个一定得有,不解释 标记基因:共重组DNA的鉴定和选择 复制原点:DNA复制起点,即DNA聚合酶结合位点