PCR扩增技术获取目的基因的原理是(pcr扩增几次可以得到完整目的基因)

PCR扩增技术获取目的基因的原理是(pcr扩增几次可以得到完整目的基因)

首页维修大全综合更新时间:2025-01-07 18:13:24

PCR扩增技术获取目的基因的原理是

PCR是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,以合成的两条已知序列的寡核苷酸为引物,在DNA聚合酶的作用下,利用dNTP为原料,将位于两引物之间的特定DNA片段进行复制。

基因克隆的基本步骤:

一、获取目的基因片段;

二、选择克隆载体;

三、限制性酶切;

四、连接;

五、转化;

六、筛选阳性重组子。获得目的基因最常用的方法是从该基因的mRNA逆转录得到cDNA,作为PCR扩增目的基因的模版,实验中通常先从细胞中提取总RNA,再逆转录获得cDNA,PCR法扩增目的基因。因此,获取目的基因与PCR扩增目的基因在步骤一中完成。

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