一是模板的原因，模板的质量很重要，加入反应里的模板"量"并不很严格，但是模板纯度要求很高，控制好模板是提高测序成功率的关键因素。
其次，DNA模板不能被污染，也就是说在挑菌落，细菌培养过程要防污染。如果菌生长的不好，提出来的模板测序也不好。
二是引物的原因，测序的引物除了通用引物就是PCR的特异引物了。测不出时考虑更换新的引物或该换另一个方向来测
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