dpph抗氧化实验步骤

方法/步骤

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清除DPPH自由基能力的测定

称取一定量的DPPH，用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液。分别取2mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液，加入2mL DPPH溶液，混合均匀，室温放置30min后，5000r/min离心10min。取上清液于517nm处测吸光值。用Vc作为阳性对照。样品对DPPH自由基的清除率用以下公式计算：

 DPPH

A0—2mL无水乙醇+ 2mL DPPH溶液的吸光值；A1—2mL样品溶液+ 2mL DPPH溶液的吸光值； A2—2mL样品溶液+ 2mL无水乙醇的吸光值。

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对Fe2+离子螯合能力的测定

分别取1mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液和3.7mL蒸馏水，加入2mmol/L的FeCl2溶液0.1mL和5mmol/L的菲洛嗪溶液0.2mL，25℃水浴10min，于562nm处测吸光值。EDTA为阳性对照。样品对Fe2+的螯合率计算公式如下：

 Fe2+

 A0—1mL蒸馏水代替反应体系中样品溶液后的吸光值；

A1—样品溶液反应后的吸光值；

A2—0.1mL的蒸馏水代替反应体系中O