1、培养容器的选择
培养红茶菌最好使用玻璃容器。瓷制容器也可以, 但不能观察其中的变化。搪瓷容器可作短期培养，不能长期使用。不能用铁制、铝制、铜制等金属容器培养红茶菌。刚开始培养红茶菌时，容器一定要用蒸煮或开水烫的办法消毒，以减少杂菌感染的机会。
2、培养液的配制
培养红茶菌的原料是茶水加糖。茶叶用红茶、绿茶、花茶均可。茶叶品质对红茶菌影响不大，故应选择价廉者。但霉变的茶叶不能用来培养红茶菌。糖可用白糖、砂糖、冰糖、葡萄糖或蜂蜜，其中以葡萄糖培养红茶菌生长最快。不要用饴糖、红糖培养红茶菌，因其杂质多，培养出的红茶菌味道不好，而且容易发霉。水要求洁净即可。糖、茶、水的重要比例是5:0.1--0.4:100。配制过程是先用开水沏茶，趁热把糖溶化于其中, 等茶水凉后再滤去茶叶，茶水温度降至30℃时就可接种。
3、接种培养。
首次培养红茶菌菌种需购买。菌液和菌膜(菌液上面漂浮的一层像海蜇一样的膜) 都可以作为菌种，最好是二者同时作菌种。菌液与培养液按1:4的比例在培养容器中混合均匀，菌膜用量不少于容器截面积的一半。然后用干净纱布或手帕盖住容器口，扎紧，这样既能防尘土，防止果蝇钻入产卵孵蛆，还可以保证通气，有利于菌膜形成。接种完毕，放在无阳光直射的地方，在28℃左右的温度下静止培养，不要运它。家庭培养红茶菌，随季节的变化，必须采取相应的措施，使温度维持在25-32℃之间，不可过高或过低，这样才能使红茶菌在10天成熟。
4、红茶菌成熟后的处理。
当菌膜呈乳白色，菌液不冒气泡，澄清透明，颜色比原来的茶水浅，酸味浓，说明已发酵成熟。也可用pH 值试纸测定其pH 值，如果已达到3.0以下则表示已成熟。已发酵成熟的红茶菌，将其菌液小心地由培养容器倾入保存菌液的容器中，注意不要使底部淡褐色的沉淀物随菌液流出。此菌液在室温下可保存2 个月或更长时间，可以陆续饮用。如放置时间较长，菌液表层重新长出薄薄的菌膜，并不影响质量。菌液倾出后，把手洗净或用消毒后的镊子把
菌膜取出，摘除菌膜上面变褐的部分，再用凉开水冲洗菌膜数遍。把容器底部沉淀物倒掉，
容器用凉开水洗干净，倒入菌液、培养液及处理好的菌膜，又可按上述方法继续培养红茶菌。
